InterProScan 5.25-64.0 安装和使用，目前最新版的interproscan

引用自 每日一生信--interproscan安装及使用（终结版）原文官网：http://code.google.com/p/interproscan/wiki/Introduction

配置要求：至少2 cores and 4 GB of RAM, 这样才能同时分析5 - 10 sequences .

软件要求:

Linux, 32 bit or 64 bit (64 bit recommended).

Perl (default on most Linux distributions)

Oracle's Java JDK/JRE version 6u4 and higher (which also includes Java 7)

Environment variables set

JAVA_HOME should point to the location of the JVM

$JAVA_HOME/bin should be added to the CLASSPATH

查看我的配置：

[wq@localhost ~]$ uname -a                    

Linux localhost.localdomain 2.6.18-238.el5 #1 SMP Sun Dec 19 14:22:44 EST 2010 x86_64 x86_64 x86_64 GNU/Linux

其中x86_64代表64 Bit

 

[wq@localhost ~]$ java -version

java version "1.6.0_35"
OpenJDK Runtime Environment (IcedTea6 1.13.7) (rhel-1.13.7.1.el5_11-x86_64)
OpenJDK 64-Bit Server VM (build 23.25-b01, mixed mode)

如果你的系统式redhat，自带java版本1.4,需要对java进行升级，使用yum就可以升级，yum安装可以查看我的另一篇博客

 

[wq@localhost ~]$perl -version

This is perl, v5.8.8 built for x86_64-linux-thread-multi

Copyright 1987-2006, Larry Wall

Perl may be copied only under the terms of either the Artistic License or the
GNU General Public License, which may be found in the Perl 5 source kit.

Complete documentation for Perl, including FAQ lists, should be found on
this system using "man perl" or "perldoc perl". If you have access to the
Internet, point your browser at http://www.perl.org/, the Perl Home Page.

 

安装interproscan5

1获得InterProScan software（x64）

mkdir interproscan

cd interproscan

wget ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/unix/iprscan/5/5.18-57.0/interproscan-5.25-64.0-64-bit.tar.gz
wget ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/unix/iprscan/5/5.18-57.0/interproscan-5.25-64.0-64-bit.tar.gz.md5

# 使用md5保证下载文件的完整性，返回OK才证明完整

md5sum -c interproscan-5.25-64.0-64-bit.tar.gz.md5

2解压缩

tar -pxvzf interproscan-5.25-64.0-64-bit.tar.gz

 

2.安装panther Models

下载Panther Models到刚解压缩的文件的子目录/data下面

cd [InterProScan5 home]/data/

wget ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/unix/iprscan/5/data/panther-data-11.1.tar.gz

wget ftp://ftp.ebi.ac.uk/pub/software/unix/iprscan/5/data/panther-data-11.1.tar.gz.md5

 

这个文件大小大概为12 GB，下载结束后需要检查一下MD5

md5sum -c panther-data-11.1.tar.gz.md5

出现# This must return *panther-data-11.1.tar.gz: OK*证明下载的没问题，否则重新下载

 

解压缩

tar -pxvzf panther-data-11.1.tar.gz

如果想把这个放在其他的文夹件的话，可以修改[InterProScan5 home]/interproscan.properties 文件，改下面的东西

panther.models.dir.10.0=PATH_TO/panther/11.1/model

 

3. 使用Pre-calculated Match Lookup 网络服务器

The pre-calculated match lookup网页服务器能够提供超过3千万蛋白序列的比对，包括所有的UniProtKB蛋白序列. InterProScan 5使用这个服务器能够加速本地服务器的速度。这是这个版本的特点要想使用这个服务器的话，需要电脑能上网：http://www.ebi.ac.uk

如果你的电脑防火墙阻止访问这个网站，你可以下载本地化的InterProScan 5 lookup service（https://code.google.com/p/interproscan/wiki/LocalLookupService）或者关掉这个功能关掉这个功能的时候，你可以在命令行加入-dp 或者修改interproscan.properties 在前面加一个#注释掉即可

precalculated.match.lookup.service.url=http://www.ebi.ac.uk/interpro/match-lookup

 

 

如何使用interproscan

./interproscan.sh -i /path/to/sequences.fasta  –o /san/  –goterms –iprlookup –pa -f xml

 

可以运行其提供的例子： ./interproscan.sh -i test_proteins.fasta -f  tsv

会得到tsv格式的结果，里面包含了很多数据库Gene3d, PIRSF，PRINTS,PANTHER,SUPERFAMILY,PFAM,TIGERFAM等比对的结果。

如果运行不了，请参考该网页提供的问题解决方案:

https://code.google.com/p/interproscan/wiki/FAQ#3.What_should_I_do_if_one_of_the_binaries_included_with_InterProScan_5_does_not_work_on_my_system?

 

Cd  /interproscan

可以直接在终端输入./interproscan.sh，你会看到用法信息

 

-appl  单独分析，没有这个的话，所有的结果都将呈现  

指定数据库，可以不加数据库的版本 

./interproscan.sh -appl PfamA -i /path/to/sequences.fasta

If you wish to specifically run two or more analyses you can include multiple -appl arguments:

也可以指定多个数据库

./interproscan.sh -appl PfamA-27.0 -appl PRINTS-42.0 -i /path/to/sequences.fasta

or you can use a single -appl option with a comma-separated list of analyses:

或者可以通过,把多个数据放在一起。

./interproscan.sh -appl PfamA,PRINTS -i /path/to/sequences.fasta

A list of all available analyses is in the section "Included Analyses"

 

-b     base output filename指定生成文件路径，跟-o效果一样，如果不加，默认的名字和路径。自动往生成文件名加指定文件后缀。

-d     output directory, 跟-b ,-o互斥，

-dp    关闭precalculated match lookup service，默认的是开启。根据md5值来快速检验这上传的数据是否已经被注释了，如果是已经注释了就直接出结果。节省时间。

-f      输出文件的格式，支持的格式为TSV, XML, GFF3, HTML and SVG。蛋白默认的格式为

TSV, XML 和 GFF3, 核酸的格式之前为GFF3 和XML，现在都可以了哦。

./interproscan.sh -f XML -f HTML -i /path/to/sequences.fasta -b /path/to/output_file

or

./interproscan.sh -f XML, HTML -i /path/to/sequences.fasta -b /path/to/output_file

集中输出格式的区别：https://code.google.com/p/interproscan/wiki/OutputFormats

-i      输入的为fasta格式文件。

-goterms开启GO注释，但前面要加上-iprlookup参数

-iprlookup开启interpro注释

-ms      最小核酸ORF的大小，如果设置的小的话，花的时间会长。

-o       跟前面的-b.-d不能同时出现，如果设置了这个，就必须设置-f

-pa      开启可能的代谢注释

-T       默认的临时文件在/tmp,这个是可以设置临时文件的位置

-t       输入序列的类型。默认的是蛋白， 可以为dna或者为rna

 

涉及到的数据库：

可以直接用的。

TIGRFAM-XX.X : TIGRFAMs 基于隐马尔可夫模型的蛋白家族库

ProDom-XXXX.X: ProDom 是由UniProt Knowledge Database自动生成的蛋白域家族。

Panther-X.X : The PANTHER (Protein ANalysis THrough Evolutionary Relationships)是一个独立的根据功能来分类平台，使用已公布的实验证据和进化关系来预测没有直接实验证据的基因的功能，

SMART-X.X : SMART 可以用来鉴别和分析基于隐马尔可夫模型的域构架        PrositeProfiles-XX.XX :PROSITE 包含描述蛋白域，家族，功能位点和关系的入口文件，用来         

区别这些蛋白的编号。

PrositePatterns-XX.X.XX :同上

SuperFamily-X.XX : SUPERFAMILY可以给核酸和蛋白做功能和结果注释的数据库。                 PRINTS-XX.X : A fingerprint是一个保守的模型用来描述蛋白家族。                 Gene3d-X.X.X :通过使用 CATH域结构数据库来对全基因和基因组进行结构分析

PIRSF-X.XX : The PIRSF是用来但做一个指导把UniProtKB序列进行无重叠和深度分类，来反映他们进化关系                  

PfamA-XX.X : 一大类蛋白家族，每一个代表对序列比对和隐马尔可夫的结果。

HAMAP-XXXXXX.XX : High-quality Automated and Manual Annotation of Microbial Proteomes高质量自动注释和手工注释微生物的蛋白组

Coils-X.X :对蛋白组卷曲螺旋区域的预测

 

无效的分析:

SignalP-GRAM_NEGATIVE-X.X : Analysis SignalP-GRAM_NEGATIVE-X.X is deactivated, because the following parameters are not set in the interproscan.properties file: binary.signalp.X.X.path

SignalP-GRAM_POSITIVE-X.X : Analysis SignalP-GRAM_POSITIVE-X.X is deactivated, because the following parameters are not set in the interproscan.properties file: binary.signalp.X.X.path

SignalP-EUK-X.X : Analysis SignalP-EUK-X.X is deactivated, because the following parameters are not set in the interproscan.properties file: binary.signalp.X.X.path

 Phobius-X.XX : Analysis Phobius-X.XX is deactivated, because the following parameters are not set in the interproscan.properties file: binary.phobius.pl.path.X.XX

TMHMM-X.Xc : Analysis TMHMM-X.Xc is deactivated, because the following parameters are not set in the interproscan.properties file: binary.tmhmm.path

 

核酸序列的扫描

     Emboss getorf.是内嵌在interproscan中的基因预测的软件，如果你想本地安装这个软件的话，必须修改interproscan.sh script

# set environment variables for getorf

export EMBOSS_ACDROOT=bin/nucleotide

export EMBOSS_DATA=bin/nucleotide

如果输入的是核酸序列，在运行命令的时候需要加入-t这个参数

./interproscan.sh -t n -i /path/to/nucleic_acid_sequences.fasta

 

格式转换

可以将xml转化为其他的格式

./interproscan.sh -mode convert -f tsv,gff3,svg -i /path/to/impact.xml -o /path/to/output_file_basename